新闻中心您现在的位置:首页 > 新闻中心 > 电穿孔系统的应用主要有以下几方面

电穿孔系统的应用主要有以下几方面

发布时间:2021-02-04   点击次数:17次
   电穿孔系统是一种特殊设备。通常将细胞放在电击杯中,电击杯的两边有电极,这样插入到仪器中后会与之有电流通路。将细菌细胞与DNA混合后上样到电击杯中,并在几微秒时间内施加1000伏到10000伏的电场。这样会在膜两边造成0.5到1伏的电压,据信这会使得细胞膜的磷脂双层重新排列,从而形成小孔。处于这个状态时,质粒DNA就能穿过膜。电脉冲停止后,膜将自身得到恢复。细菌摄入质粒后,就可在含抗生素的琼脂糖培养板上生长。
  电穿孔系统转化的一个替代方法是热激法转化,它需要用到氯化钙和热激来处理细菌,从而将DNA导入细胞内。通常,热激法要比电穿孔法更温和并且不需要低盐浓度。连接反应,就是将您的目的基因插入到质粒后形成的产物,可以被直接用来做热激转化。热激法比电穿孔法便宜,无需使用昂贵的设备或电击杯。但另一方面,热激法的转化效率要比电穿孔法低,并且耗时长。而且它仅局限于细菌,酵母和植物原生质体,而电穿孔法还可用于哺乳动物细胞。
  这里您看到的是将小鼠的胚胎成纤维细胞放置在电击杯中。当电穿孔完成后,转化效率可通过观察细胞合成一种质粒编码的绿色荧光蛋白的表达程度来判断。转染这个术语是指对哺乳动物细胞的转化,它通常要比细菌细胞所需的电场强度低,并有更高的时间常数。
  电穿孔系统还可用于整个动物,如您在这里看到的发育中的鸡胚胎。将质粒DNA注射到鸡的脑部,然后使用一个电穿孔探头在脑组织中施加电场。1到2天后,神经元将合成的质粒编码的绿色和红色荧光蛋白,科研人员可观察发育中鸡的脑组织的结构变化。 
上海芮劢生物科技中心

上海芮劢生物科技中心

地址:上海市金山工业区亭卫公路6495弄168号5幢1楼2024室

主营产品:进口荧光定量pcr仪,T100 PCR仪,伯乐电穿孔转印系统

© 2021 版权所有:上海芮劢生物科技中心  备案号:沪ICP备20018812号-1  总访问量:12700  站点地图  技术支持:化工仪器网  管理登陆

QQ在线客服
联系方式

13621641125

021-31200557