PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度,DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的
进口荧光定量pcr仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。
故障排除:
1、反应后反应管壁出现液滴?
可能原因:运行程序前没有开启热盖加热功能
解决方法:开启热盖加热功能
可能原因:反应结束后低温保存时间过久
解决方法:运行结束后,热盖将自动关闭,所以冷凝会自然出现,这不会对实验结果产生影响,将反应管置于离心机上瞬时离心使液滴回到管子底部即可。
2、使用的微孔板,反应后反应液有明显蒸发?
解决方法:确保使用高质量的微孔板,反应前要严格密封
解决方法:确保盖紧热盖,适当提高热盖的温度
解决方法:增大反应体积
3、使用PCR管,反应后部分PCR管内反应液有明显蒸发?
解决方法:确保使用高质量的PCR管或使用我们推荐的PCR管
解决方法:在样品台的四角放置四个同样的空PCR管,以保证热盖压在各PCR管上的压力均匀
4、打开电源但是进口荧光定量pcr仪不响应
这种情况很可能是由于电源线脱落或者没有插紧而致,将电源线重新插入插座即可排除故障。
5、屏幕无显示且马达与风扇不启动
这种情况很可能是总保险丝被熔断而造成的,更换保险丝即可排除故障,更换准确型号保险丝是所有用电仪器常见的故障排除办法,需要注意的是更换时一定要严格按照使用说明书来进行,或者邀请生产厂家维修工程师来完成。
6、显示的样品池温度不正确
一般的进口荧光定量pcr仪附件中都含有温度校准设备,用于定时对各样品孔的温度进行校准或者用于定期检查各样品孔温度的均一性,有的设备将其作为标准配置,购买时不需另行定购,但有些品牌的仪器将其作为选购件,购买时就得选配。